Semana 5 11/6

Como a manu algunos experimentos le dieron menor cantidad, decidió ver si plasmidos de VP16 nuevo, estaba bien y había solo plasmido, o había otras cosas.
Para esto lo que hicimos fue hacer una restricción de un plasmidos viejo de VP16 que si sabemos que es el plasmido solo una restricción del plasmido nuevo. Para ahcer la restricción lo que hicimos fue cortar los plamidos con 3 enzimas de restricción diferentes, para poder tener mas comparaciones.
lo que hicimos fue:

1. Poner un un tubo el volumen en el que halla 1,5 ug de plasmido(x3para el viejo y para el nuevo)
   
2. poner 2 ul del Buffer, correspondiente a cada enzima, en cada tubo(uno nuevo y uno viejo)
3. poner un volumen de agua destilada para llegar a 20ul finales
   
4. poner 1ul de enzima, una enzima por tubo. Las enzimas usadas fueron Eco RI, BanHI y XhoI.
5. llevar a incubar a 37ºC por 1h

luego para poder ver en cuantos fragmentos se cortaban los palsmidos, hicimos una electroforesis en gel de agarosa 1%. Si el plasmido nuevo tiene solo el plasmido de VP16, las bandas que aparecen en la electroforesis debería ser igual entre el viejo y el nuevo cortados con la misma enzima. Pero si parecen bandas que no coinciden con las del plasmido viejo, significa que hay algún contaminante.
No pudimos ver el resultado de esta electroforesis porque no llegábamos con el timepo.
Manu tampoco puedo analizar los resultados de la electroforesis en poiliacrilamida de la semana pasada y tampoco pudo analizar los resultados del daño con UVB de la semana pasada.
Así que la semana que viene les traemos todos los resultado!!