Semana 2 21/5

El jueves 21/5 llegamos, charlamos y resuspendimos plásmidos que Manuel había obtenido el día anterior.
Luego de resuspender los plásmidos, preparamos un gel de agarosa 1% para poder hacer una electroforesis con el objetivo de conocer la concentración aproximada de los plásmidos. Al gel le agregamos bromuro de etidio para poder revelar luego con luz UV la electroforesis. Una vez preparado, lo dejamos gelificando y, mientras tanto, Manuel nos explicó el fundamento de esta técnica.
Después preparamos las muestras de los plásmidos resuspendidos y también preparamos las muestras de un plásmido viejo de concentración conocida. La preparación consintió en:

• tomar un volumen de plasmido resuspendido,
• agregar un pequeño volumen de un colorante(el objetivo de este es darle mas densidad a la solución para que no quede flotando en el buffer de la corrida y tener una aproximación de por donde esta el ADN ya que este colorante corre en el mismo sentido que el ADN),
• completar el volumen para llegar a un volumen en común, en este caso 10 ul
  

Todo esto lo hicimos para saber la concentración aproximada de los plásmidos para que Manuel pueda transfectar células, ya que cuando se transfectan células, la cantidad de plásmido debe ser constante ya que a la célula no le gusta que sea muy concentrado.